第10回 2019/6/19

• 講師：正井 久雄

がん細胞の発生

• がんの要因としては色々なものがあるが、「複製の阻害」が発ガンの引き金となっていることがわかっている。
• 停止してしまった複製フォークの適切なプロセッシングは、遺伝的安定性の維持に必須である。
• 特に大腸菌などの原核生物は複製フォークが一箇所しかないので、複製が停止したらいち早く認識して修復する必要がある。
• 停止複製フォークを認識するのがPriAタンパク質である。

PriA欠損変異株の表現型

PriAがなくなると、以下のようになる。

• 増殖速度・生存率の低下、rich media感受性を示す。
• 線状の形態を示す（SOS反応が一部の細胞で誘導されている）。
• DNA障害性因子（紫外線、マイトマイシンCなど）に対する感受性の増大
• 一般的な相同組換え頻度の低下
• 複製フォーク停止（例えば紫外線処理やチミン飢餓）に応答して誘導される組換え依存性の安定的DNA複製（タンパク合成非存在下での連続的な複製）の欠損

PriAタンパク質の生化学的性質

• \(\phi X174\) という一本鎖フィードフォワードDNAの複製に必要
• \(\mathrm{n^{\prime}}\)-pas(primosome assembly site)と呼ばれる小さな一本鎖ヘアピン配列に結合し、プライモソームの形成を促進する。
• \(\mathrm{n^{\prime}}\)-pasあるいはD-loop構造に依存してATP加水分解およびDNAヘリカーゼ活性を示す。
• 合成D-loop様構造、あるいはアレストフォーク様構造に統合する。
• D-loopあるいは停止フォーク構造に特異的に結合する。
• 複製フォークが停止した際の構造は様々であり、Leading strand, Both strand の時にはPriAはくっつくが、Laggin strandの時はつかない。
• PriAが苦手とするLaggin strand の方にはRecGが結合してフォークを巻き戻し（退行）、3'末端が近くに来るようにすると、PriAが結合できるようになる。